Kombide test

Mis on Coombsi test?

Coombsi testi kasutatakse punaste vereliblede (erütrotsüütide) vastaste antikehade tuvastamiseks. Antikehade määramiseks kasutatakse niinimetatud Coombsi seerumit, mis saadakse küülikute seerumist ja sensibiliseeritakse inimese antikehade suhtes.
Testi kasutatakse hemolüütilise aneemia, reesuse kokkusobimatuse korral või vahetult enne vereülekande kahtlust. Hemolüütiline aneemia on aneemia vorm ja reesuse kokkusobimatus kirjeldab veregrupi kokkusobimatust.
Coombsi testi on kahte tüüpi: otsene ja kaudne test erinevad näitamise ja teostamise osas.

Coombsi testi põhjused

Hemolüütilise aneemia kahtluse korral kasutatakse otsest Coombsi testi. Hemolüütiline aneemia kirjeldab aneemiat, mille korral vererakud lagunevad kahjustuse tõttu enneaegselt.
Autoimmuunhaiguste, näiteks süsteemse erütematoosluupuse, reumatoidartriidi või kroonilise lümfotsütaarse leukeemia korral moodustuvad antikehad, mis on suunatud keha enda vererakkude (nn erütrotsüüdid) vastu. Antikehade sidumine viib vererakkude varajase lagunemiseni või veresoonte vererakkude kogunemiseni. Mõlemad põhjustavad hemoglobiini väärtuse langust.

Teine otsene Coombsi testi näidustus on haemolyticus neonatorum haigus, siin moodustuvad reesusnegatiivse ema kehas reesusfaktori vastased antikehad. Kui sündimata laps on reesuspositiivne, võivad emalt saadud antikehad siseneda loote vereringesse ja algatada sealsete vererakkude suurenenud lagunemise. Vastsündinud paistavad silma raske aneemia ja ikterusega.

Coombsi testi kasutatakse vereülekande ravimites regulaarselt. Seda kasutatakse veregruppide määramiseks enne vereülekannet (voodikatse), mille käigus segatakse väike vereproov erinevate A, B, AB ja 0 veregruppide seerumitega. Kui veri jääb vedelaks, sobib patsiendi veri vastava veregrupiga. Vereülekannet saab läbi viia.

Kaudset Coombsi testi saab kasutada ka patsiendi kehas olevate vabade antikehade otsimiseks (antikehade otsingu test), nt. sünnituskontrolli ajal onkoloogiliste patsientide või juba vereülekande saanud inimeste vereülekande ettevalmistamisel.

Uuri kogu teema kohta siit: Rh talumatus.

Ettevalmistus

Coombsi testi ettevalmistamisel valmistatakse esmalt ette antikehadega seerumid, mida tuleb testida. Need täidetakse erinevatesse katseklaasidesse või kantakse katsekaartidele.

Igapäevases kliinilises praktikas nt. koos voodikatsega on juba ette valmistatud testkaardid, mida saab kohe kasutada. Järgmisena võetakse patsiendilt veri ja valmistatakse see ette testi jaoks. Sõltuvalt sellest, millist Coombsi testi tehakse, on vaja patsiendi vererakke või seerumit (vere vedel osa).

Jada

Kui viiakse läbi otsene Coombsi test, filtreeritakse punased verelibled patsiendi verest välja. Tuleb testida, kas nende peal on IgG tüüpi antikehi, mis põhjustavad kehas hemolüütilist aneemiat või veregruppide kokkusobimatust. Coombsi seerum sisaldab inimese IgG antikehade vastaseid antikehi. Segu kuumutatakse (inkubeeritakse) pikka aega. Kui punastel verelibledel on antikehi, siis nad klompivad ja test muutub positiivseks.

Kaudne Coombsi test koosneb kahest osast. Eesmärk on kindlaks teha antikehad, mis on veres vabad ega ole seotud vererakkudega.
Seekord filtreeritakse vedel osa (seerum) patsiendi verest. Esiteks lisatakse testi jaoks seerumisse punased verelibled. Kui seerumis on vabu antikehi, seostuvad nad punaste verelibledega. See reaktsioon pole nähtav. Ainult teises etapis, nagu ka otseses Coombsi testis, lisatakse Coombsi seerum koos inimese antikehade vastaste antikehadega ja soojendatakse. Ka siin klõpsub lahendus positiivse tulemuse korral.

Hindamine

Kui antikehad kombineeritakse sobiva Coomi seerumiga, seostuvad antikehad seerumis (vere vedel osa) patsiendi antikehadega. Antikehad on Y-kujulised, mis tähendab, et nad saavad alati siduda kahte sidumispartnerit ja ristsidestada punaseid vereliblesid üksteisega. Luuakse suur vererakkude kuhjumine. Need tükid muutuvad nähtavaks - veri aglutineerub (tükid) ja test on positiivne.
Kui patsiendil puuduvad sobivad antikehad, jääb seerum vedelaks. Te ei näe mingit muutust - test on negatiivne.

Millised on alternatiivid?

Coombsi testi alternatiiviks on immunoloogiline ELISA meetod (ensüümiga seotud immunosorbentide test), milles teatud antikehad on tähistatud ensüümiga. See antikeha lisatakse testlahusele. Kui märgistatud antikehad reageerivad testlahuses sisalduvate antikehadega, aktiveeritakse seotud ensüüm ja saadakse värvaine. Vastavad katseklaasid muudavad värvi - test on positiivne.

Lisaks ELISA protseduurile on olemas ka WESTERNi blot, mida kasutatakse sageli positiivse ELISA kinnitava testina.